Différence clé - Cytométrie en flux vs FACS

Dans le contexte de la théorie cellulaire, les cellules sont l'unité structurelle et fonctionnelle de base de tous les organismes vivants. Le tri cellulaire est une méthodologie utilisée pour séparer différentes cellules en fonction des caractéristiques physiologiques et morphologiques. Ils peuvent avoir des caractéristiques intracellulaires ou extracellulaires. L'interaction de l'ADN, de l'ARN et des protéines est considérée comme des propriétés interactives intracellulaires tandis que la forme, la taille et les différentes protéines de surface sont considérées comme des propriétés extracellulaires. Dans la science moderne, les méthodologies de tri cellulaire ont conduit à aider les différentes recherches dans les études biologiques et aussi à établir de nouveaux principes par la recherche en médecine. Le tri des cellules est effectué selon diverses méthodologies qui incluent à la fois des méthodes primitives avec moins d'équipement et des méthodologies technologiques avancées utilisant des machines sophistiquées. La cytométrie en flux, le tri de cellules activées par fluorescence (FACS), la sélection de cellules magnétiques et le tri de cellules uniques sont les principales méthodologies utilisées. La cytométrie en flux et FACS sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques. FACS est un type spécialisé de cytométrie en flux. La cytométrie en flux est une méthodologie qui est utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules en fonction de différentes molécules de surface cellulaire, de taille et de volume qui permet l'étude de cellules uniques. FACS est un processus par lequel un mélange d'échantillons de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence dans deux conteneurs ou plus. C'est la principale différence entre la cytométrie en flux et FACS.

CONTENU

1. Aperçu et différence clé 2. Qu'est-ce que la cytométrie en flux 3. Qu'est-ce que FACS 4. Similitudes entre la cytométrie en flux et FACS 5. Comparaison côte à côte - Cytométrie en flux vs FACS sous forme de tableau 6. Résumé

Qu'est-ce que la cytométrie en flux?

La cytométrie en flux est une méthode utilisée pour examiner et déterminer l'expression des molécules intracellulaires et de la surface cellulaire et pour définir et caractériser des types cellulaires distincts. Il est également utilisé pour déterminer le volume et la taille des cellules et pour évaluer la pureté des sous-populations isolées. Cela permet l'évaluation multi-paramètres de cellules uniques à peu près en même temps. La cytométrie en flux est utilisée pour mesurer l'intensité de la fluorescence produite par les anticorps marqués par fluorescence qui aident à identifier les protéines ou les ligands qui se lient aux cellules associées.

Généralement, la cytométrie en flux comprend principalement trois sous-systèmes. Ce sont la fluidique, l'électronique et l'optique. En cytométrie en flux, cinq composants principaux sont disponibles qui sont utilisés dans le tri cellulaire. Ils sont, une cellule à écoulement (un flux de liquide qui est utilisé pour les transporter et aligner les cellules pour le processus de détection optique), un système de mesure (peut être de différents systèmes, y compris les lampes au mercure et au xénon, à haute puissance refroidi par eau ou lasers refroidis par air de faible puissance ou lasers à diodes), un ADC; Convertisseur analogique-numérique, système d'amplification et ordinateur d'analyse. L'acquisition est le processus par lequel les données sont collectées à partir des échantillons à l'aide d'un cytomètre en flux. Ce processus est médié par un ordinateur connecté au cytomètre en flux. Le logiciel présent dans l'ordinateur analyse les informations transmises à l'ordinateur par le cytomètre en flux. Le logiciel a également la capacité d'ajuster les paramètres de l'expérience contrôlant le cytomètre en flux.

Qu'est-ce que FACS?

Dans le contexte de la cytométrie en flux, le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) est une méthode utilisée pour différencier et trier un échantillon d'un mélange de cellules biologiques. Les cellules sont séparées de deux ou plusieurs conteneurs. La méthode de tri est basée sur les caractéristiques physiques de la cellule qui incluent les caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence de la cellule. Il s'agit d'une technique scientifique importante, qui peut être utilisée pour obtenir des résultats quantitatifs et qualitatifs fiables des signaux de fluorescence émis par chaque cellule. Au cours de FACS, initialement, le mélange de cellules pré-obtenu; une suspension est dirigée vers le centre d'un étroit flux de liquide qui coule rapidement. Le flux de liquide est conçu pour séparer les cellules de la suspension en fonction du diamètre de chaque cellule. Un mécanisme de vibration est appliqué au flux de suspension, ce qui entraîne la formation de gouttelettes individuelles.

Le système est calibré afin de créer une seule gouttelette avec une cellule. Juste avant la formation de gouttelettes, la suspension d'écoulement se déplace le long d'un appareil de mesure de fluorescence qui détecte la caractéristique de fluorescence de chaque cellule. Au point de formation des gouttelettes, un anneau de charge électrique est placé dont une charge est induite sur l'anneau avant la mesure de l'intensité de fluorescence. Une fois que les gouttelettes sont formées à partir du courant de suspension, une charge est piégée dans les gouttelettes qui pénètre ensuite dans un système de déviation électrostatique. Selon la charge, le système détourne les gouttelettes dans différents conteneurs. La méthode d'application de la charge varie selon les différents systèmes utilisés dans FACS. L'équipement utilisé dans FACS est connu comme un trieur de cellules activé par fluorescence.

Quelle est la similitude entre la cytométrie en flux et FACS?


  • La cytométrie en flux et FACS sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques.

Quelle est la différence entre la cytométrie en flux et FACS?

Résumé - Cytométrie en flux vs FACS

La cellule est l'unité structurelle et fonctionnelle de base de tous les organismes vivants. Le tri cellulaire est le processus par lequel les cellules sont isolées et différenciées en différentes catégories en fonction de leurs propriétés intracellulaires et extracellulaires. La cytométrie en flux et FACS sont deux méthodologies importantes dans le tri cellulaire. Les deux processus sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques. La cytométrie en flux est une méthodologie qui est utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules en fonction de différentes molécules de surface cellulaire, de taille et de volume qui permet l'étude de cellules uniques. FACS est un processus par lequel un mélange d'échantillons de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence dans deux conteneurs ou plus. C'est la différence entre la cytométrie en flux et FACS.

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Référence:

  1. Cytométrie en flux (FCM) / FACS | Tri cellulaire activé par fluorescence (FACS). Consulté le 22 septembre 2017. Disponible ici Ibrahim, Sherrif F. et Ger van den Engh. "Cytométrie en flux et tri cellulaire." SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1er janvier 1970.. Consulté le 22 septembre 2017. Disponible ici

Courtoisie d'image:


  1. 'Cytometer'By Kierano - Own work, (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia' Fluorescence Assisted Cell Sorting (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Développement d'un système de modèle in vitro pour étudier l'interaction d'Equus caballus IgE avec son récepteur FcεRI de haute affinité (thèse de doctorat), Université de Sheffield, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia